HIV-1假病毒包装及感染条件优化

检验医学与临床, 201, 14(15)

Lab Med Clin, Aug. 2017, Vol.14, No.15

摘要：

目的 对人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)假病毒包装及感染条件进行优化，获得高重复性、高稳定性和高滴度的假病毒包装方法和较高的感染效率。

方法 采用pSG3△env质粒与pcDNA3.1-SF162rev/env质粒共转染293T细胞包装病毒，对HIV假病毒骨架质粒与env真核表达质粒转染比例、转染试剂与质粒比例、假病毒收获时间对HIV假病毒包装滴度的影响进行实验，同时对感染过程中假病毒接种剂量与二乙氨乙基葡聚糖(DEAE-Dextran)使用浓度进行了优化。

结果 在包装过程中当HIV假病毒骨架质粒与env真核表达质粒转染比例为4：1、转染试剂与质粒比例为3∶1，转染后培养48h HIV-1假病毒的滴度最高；在假病毒感染过程中，15μg/mL的DEAE-Dextran可有效增加假病毒的感染效率且不会对细胞造成较大毒性。

结论 通过对包装和感染过程中关键条件的优化，可以有效提高HIV-1假病毒的包装和感染效率，增加实验技术稳定性，为新型抗艾滋病药物筛选和艾滋病疫苗评价等研究奠定了基础。

关键词：人类免疫缺陷病毒，假病毒，包装方法，二乙氨乙基葡聚糖

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